TA クローニング

　植物防疫にTAクローニングの記事を書くため神戸大学のMeterousという寄生蜂を題材にマイクロサテライト探索を行う．まず，マイクロサテライト用のプライマーで増やしたPCR産物とpGEM-T (Easy) Vector Systemsを混ぜ合わせる．これを1晩置く（本当は: pGEM-T (Easy) Vector Systems は1時間から1.5時間で良いのだが）．その間にLB培地を用意するのだが，今回はNaOHが無くなっていたので，インビトロジェン社のimMedia Amp Blueを使った．これは最初からIPTGやX-galなどすべてが入っているものである．粉状になっているので200mlの滅菌水を足して電子レンジでチンをしたら終わり．あとはシャーレにそのまま入れて完成．注意点は電子レンジで説明書の通り，いきなり2分から3分かけたら(600W）沸騰して大変なことになるので，よーく見て沸騰しかけたら（1分ぐらい）止めて，よく回す．また，よーく見て沸騰しかけたら回す．それを繰り返して透明になったら終わり．また，SOC培地もインビトロジェンの出来合いを使う．本当に便利である．